Les milieux d'isolement des bactéries du genre Staphylococcus

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 Gélose sélective Mannité de  CHAPMAN

But

Composition

Principe

Utilisation

Lecture

Remarques

Le milieu de Chapman au mannitol est un milieu sélectif des bactéries du genre Staphylococcus

Ce milieu est particulièrement intéressant pour l'isolement est l'orientation au sein du genre Staphylococcus de l'espèce aureus

En effet ce milieu permet de mettre en évidence l'utilisation du mannitol comme source de carbone et d'énergie et l'espèce S. aureus est mannitol(+).

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But

Composition

Principe

Utilisation

Lecture

Remarques

Peptone 10,0 g source de C, N, d'acides aminés et d'énergie dans certains cas
Extrait de viande de boeuf 1,0 g source de C, N, d'acides aminés et de facteurs de croissance.
Mannitol  10,0 g GLUCIDE : Source principale de carbone et d'énergie
chlorure de sodium  75,0 g forte pression osmotique : milieu hypersalé joue un rôle sélectif
Rouge de phénol 25 mg indicateur coloré de pH
agar  15,0 g Le milieu est solide : gélose
pH = 7,4 pH neutre le milieu est de couleur orangé

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But

Composition

Principe

Utilisation

Lecture

Remarques

(1) c'est un milieu sélectif des bactéries du genre Staphylococcus.

Ce milieu présente une forte concentration en NaCl qui en fait un milieu hypertonique = (forte pression osmotique) ce qui a pour effet d’inhiber de la croissance des bactéries sensibles comme beaucoup de bactéries Gram(-).

L’hypertonicité n’aura pas d’effets sur la croissance des bactéries du genre Staphylococcus, et quelques autres genres, qui seront dits résistants à l’hypertonicité du milieu.

Après incubation seul les bactéries bactéries résistantes se seront développée.

Ce milieu est dit sélectif des bactéries du genre Staphylococcus (coque Gram(+)Cf. cours).

Ce milieu est particulièrement utilisé pour mettre en évidence Staphylococcus aureus (connu sous le staphylocoque doré) bactérie responsable de nombreuses maladies et intoxination.

Cette caractéristique physiologique des Staphylococcus est mise en œuvre dans ce milieu pour pouvoir les séparer isoler d'un mélange polymicrobien comme un prélèvement biologique.

 

Attention : Si ici l’agent inhibiteur est la forte concentration en NaCl qui créer une pression osmotique très forte. Le NaCl est présent généralement dans de nombreux milieux où il joue un rôle important celui du maintient de la pression osmotique. Mais dans ce cas sa concentration ne dépasse jamais 9 g/L.

 

(2) Ce milieu permet de mettre en évidence l'utilisation du mannitol (glucide) comme source de carbone et d'énergie.

Pourquoi rechercher l'utilisation du mannitol comme source de carbone et d'énergie ?

Parmis les bactéries du genre Staphylococcus capable de se développer sur ce milieu on sais que Staphylococcus aureus utilise le mannitol (glucide) comme source de carbone et d'énergie.

Comment mettre en évidence l'utilisation du mannitol comme source de carbone et d'énergie ?

Quelle source de carbone et d'énergie la bactérie est capable d'utiliser ? Conséquence de la dégradation de la source de carbone et d'énergie Utilisation d'un indicateur coloré de pH pour révéler le pH du milieu et donc le comportement de la bactérie
Soit la bactérie est capable de dégrader le mannitol (glucide) en l’utilisant comme source de carbone et d’énergie. La dégradation du mannitol aboutit à la production de nombreux produits acides qui vont abaisser le pH du milieu. virage au jaune du rouge de phénol
Si la bactérie est incapable de dégrader le mannitol elle utilisera alors les acides aminés des peptones du milieu comme source de carbone et d'énergie La dégradation des peptones comme source de carbone et d'énergie se traduira par la libération de composés alcalins virage au rouge du rouge de phénol

 

 

 

 

 

 

 

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But

Composition

Principe

Utilisation

Lecture

Remarques

Préparation : 111 g par litre. Autoclavage classique.

Ensemencement : Le milieu se présente sous forme d'une gélose coulé en boîte de Pétri. 

L'ensemencement consiste à réaliser un isolement par la technique d'épuisement en surface à l'aide d'une anse de platine ou d'une pipette Pasteur. Choisissez l'anse de platine c'est moins dangereux !

Incubation : 24 h 37 °C.

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But

Composition

Principe

Utilisation

Lecture

Remarques

(1) Lecture de l'effet sélectif.

La culture démontre que la bactérie cultive en milieu hypersalé (voir composition)

Elle est résistante à l'hypertonicité.

A lire seulement si vous avez aborder la systématique bactérienne.

Seuls cultivent sur ce milieu certaines bactéries de la famille des Micrococcaceae surtout le genre Staphylococcus et quelques autres genres (Bacillus (bacilles Gram(+) catalase(+)) et Enterococcus (coques Gram(+) catalase(-))) et même très rarement des bacilles Gram (-).

 

(2) Lecture du caractére Mannitol (glucide).

Caractère

Schématisation des résultats

Photos Interprétation et résultats
- le milieu est jaune, il y a virage de l'indicateur coloré (le rouge de phénol), le milieu est donc acide

- la bactérie a donc fermenté le mannitol

- la bactéries est dite mannitol +

 

- le milieu est rouge, il n'y a pas virage de l'indicateur coloré (le rouge de phénol), le milieu est donc neutre ou légérement alcalin

- la bactérie n'a donc pas fermenté le mannitol

- la bactéries est dite mannitol -

 

 

 

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Les milieux d'identification

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