Les milieux d'identification

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 Milieu Citrate de Simmons

But

Composition

Principe

Utilisation

Lecture

Remarques

Ce milieu permet de mettre en évidence l'utilisation du citrate comme seule source de carbone et d'énergie. Ce caractère est intéressant pour discriminer les bactérie entre-elles et ainsi de les identifier.

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But

Composition

Principe

Utilisation

Lecture

Remarques

Composition en g.L-1

citrate de sodium 1,0 gici le citrate de sodium est la seule source de carbone et d'énergie. Si la bactérie se développe c'est qu'elle est capable de l'utiliser. Seule source de carbone et d'énergie du milieu
sulfate de magnésium 0,2 g source d'ions sulfate et magnésium
hydrogénophosphate de potassium 1,0 g source d'ions phosphate et potassium
dihydrogénophosphate d'ammonium 1,0 g source d'ions phosphate et d'azote
chlorure de sodium 5,0 g Maintient de la pression osmotique
agar 15,0 g  au dessus de 15g/L d'agar le milieu est solide
pH = 7,1 milieu neutre
bleu de bromothymol 0,08 g Incidateur coloré de pH, à ce pH le milieu est vert

Le milieu contient que des éléments connu en qualité et en quantité de façon précise ce milieu fait parti des milieux synthétiques.

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But

Composition

Principe

Utilisation

Lecture

Remarques

Le substrat est ici le citrate. Il est ici la seule source de carbone et d'énergie pour la bactérie. 

La présence de colonies le long de la strie centrale d'ensemencement sera la preuve d'un développement bactérien ce qui traduira le fait que la bactérie est capable d'utiliser le citrate comme seule source de carbone et d'énergie. La présence d'un indicateur coloré de pH comme le BBT permettra de mettre en évidence une alcalinisation en cas d'utilisation du citrate. Attention la présence de colonie est l'élément majeur de la lecture. 

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But

Composition

Principe

Utilisation

Lecture

Remarques

Préparation : 23 g par litre. Stérilisation classique. Conditionnement en tubes inclinés.

Ensemencement  : strie centrale 

Incubation : ATTENTION : le bouchon doit être débloqué pour l'incubation l'oxygène de l'air est nécessaire pour la culture de bactéries su ce milieu.

 


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But

Composition

Principe

Utilisation

Lecture

Remarques

Caractère

Schématisation des résultats

Photos

Interprétation et résultats

Les bactéries utilisant le citrate comme seule source de carbone bleuissent normalement le milieu (alcalinisation)les bactéries ne l'utilisant pas ne cultivent pas. Toutefois, des bactéries peuvent utiliser le citrate comme seul source de carbone sans bleuir. (Enterococcus

ATTENTION avant toute lecture vérifier que vous aviez débloqué le bouchon pour l'incubation.

 

Citrate (+) Citrate (-)
Observations

 

 

Interprétation raisonnement

- La présence de colonies sur la pente du milieu citrate de Simmons est la preuve d'un développement bactérien.

- Puisque le citrate est la seule source de carbone et d'énergie du milieu la bactérie est capable d'utiliser le citrate comme seule source de carbone et d'énergie pour se développer.

- PAS de colonies sur la pente du milieu citrate de Simmons donc pas développement bactérien. De plus le milieu est de couleur verte ce qui traduit l'absence de toute modification de milieu.

 -Puisque le citrate est la seule source de carbone et d'énergie du milieu la bactérie n'est pas capable d'utiliser le citrate comme seule source de carbone et d'énergie pour se développer.

Conclusion

La bactérie est dite

Citrate (+) Citrate (-)

 

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But

Composition

Principe

Utilisation

Lecture

Remarques

ATTENTION : 

- le bouchon doit être débloqué pour l'incubation.

-l'ensemencement ce fait par une strie centrale. L'ensemencement par strie serrées peut porté la lecture à la confusion. En effet, le labourage de la gélose peut être confondu avec des colonies.

 

Lecture de ce caractère sur la galerie API 20E (R).

 

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